La mayoría de los estudios de investigación involucran el cultivo de células animales y, por lo tanto, estos estudios requieren el mantenimiento de líneas de células animales en condiciones especiales de crecimiento. El cultivo de células animales se realiza ampliamente en estudios farmacológicos para identificar el metabolismo de fármacos, en el diagnóstico de enfermedades y en la investigación del cáncer. Los medios de cultivo celular son un aspecto importante del cultivo de células animales. Águila modificada de Dulbecco mediana (DMEM) y Instituto Conmemorativo de Roswell Park Medio (RPMI) son dos medios de cultivo utilizados en el cultivo de células animales. RPMI es un medio ampliamente utilizado para cultivar células de mamíferos en cultivo en suspensión. DMEM es un tipo modificado de medio basal, con concentraciones incrementadas de aminoácidos y vitaminas hasta cuatro veces. DMEM se utiliza en el cultivo de células en cultivos adherentes. La diferencia clave entre los dos medios es el tipo de cultura de los medios. RPMI se usa en cultivos en suspensión, mientras que DMEM se usa para cultivar células adherentes.
RPMI o Roswell Park Memorial Institute Medium también se conoce como RPMI1640. El nombre de los medios se derivó del instituto en el que se descubrieron los medios. Este medio se usa comúnmente en el cultivo de células animales, especialmente para el crecimiento de células de mamíferos. Fueron desarrollados originalmente para cultivar linfocitos humanos.
Los siguientes ingredientes están incluidos en el RPMI.
Glucosa
indicador de pH (rojo fenol)\
Sales (cloruro de sodio, bicarbonato de sodio, fosfato disódico, cloruro de potasio, sulfato de magnesio y nitrato de calcio)
Aminoácidos
Vitaminas (i-inositol, cloruro de colina, ácido paraaminobenzoico, ácido fólico, nicotinamida, clorhidrato de piridoxina, clorhidrato de tiamina, pantotenato de calcio, biotina y riboflavina, cianocobalamina)
La característica especial de RPMI es la mayor concentración de fosfato en el medio. RPMI se utiliza en una atmósfera de dióxido de carbono al 5%. Esto proporcionará las condiciones máximas y óptimas para el crecimiento celular. El pH de los medios se mantiene en 8,0 mediante el sistema tampón de bicarbonato.
Figura 01: Cultivo celular en una placa de Petri
Aplicaciones de RPMI en cultivo celular
Cultivo de linfocitos T y B humanos, células de médula ósea e hibridomas.
Se utiliza para estudiar células neoplásicas humanas.
¿Qué es DMEM?
El medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) es un medio modificado que se prepara comercialmente. La textura original del polvo medio es amarilla. En DMEM, la concentración de vitaminas aumenta hasta cuatro veces, aumentando así el contenido de nutrientes en el medio.
DMEM también se modifica agregando más sales como nitrato férrico, piruvato de sodio y algunos aminoácidos no esenciales como serina y glicina. La formulación de glucosa en el medio también se altera. La formulación original está compuesta por 1000 mg/L de glucosa, mientras que en DMEM se aumenta la concentración hasta 4500 mg/L. DMEM también requiere la suplementación de un medio de suero ya que no es un medio completo. Muy a menudo, DMEM se complementa con suero bovino fetal (FBS). FBS proporciona las proteínas y los factores de crecimiento necesarios para el proceso de cultivo.
El pH del medio varía con la adición de bicarbonato de sodio. El pH del medio antes de agregar bicarbonato de sodio es de alrededor de 6,80 a 7,40, mientras que el pH después de agregar bicarbonato de sodio se encuentra en el rango de 7,60 a 8,20. La temperatura de almacenamiento del medio es de 2 a 8 0C.
Figura 02: DMEM
Aplicaciones de DMEM
Estudiar la capacidad de formación de placas del poliomavirus en células embrionarias de ratón.
En estudios de inhibición por contacto.
En investigación y análisis de cultivos de células de pollo.
¿Cuáles son las similitudes entre RPMI y DMEM?
Tanto RPMI como DMEM se utilizan en cultivos de células animales.
Tanto los medios RPMI como DMEM son formulaciones líquidas.
Tanto el medio RPMI como el DMEM contienen los aminoácidos esenciales, las vitaminas y las sales inorgánicas necesarias para el crecimiento.
Los medios RPMI y DMEM están incompletos. Por lo tanto, se debe agregar suero.
Tanto el medio RPMI como el DMEM utilizan glucosa como fuente de carbono.
Tanto el medio RPMI como el DMEM tienen un pH más alto.
¿Cuál es la diferencia entre RPMI y DMEM?
RPMI frente a DMEM
RPMI es un medio ampliamente utilizado para cultivar células de mamíferos en un cultivo en suspensión.
DMEM es un tipo modificado de medio basal con mayores concentraciones de aminoácidos y vitaminas.
Presencia de fosfatos adicionales
Presente en RPMI.
Ausente en DMEM.
Usar
Cultivo de linfocitos T y B humanos, células de médula ósea e hibridoma.
Se utiliza para estudiar células neoplásicas humanas.
Se utiliza para cultivar células en cultivos adherentes. Es usado para,
estudiar la capacidad de formación de placas del poliomavirus en células embrionarias de ratón.
estudiar la inhibición por contacto.
investigar y analizar cultivos de células de pollo.
Tipos de cultura
RPMI se utiliza para cultivos en suspensión.
DMEM se utiliza para cultivos con células adheridas.
Resumen – RPMI frente a DMEM
Tanto RPMI como DMEM se usan ampliamente en el cultivo de células animales, especialmente para cultivar líneas de células animales, incluidos los linfocitos. in vitro. DMEM es un medio basal modificado donde hay una mayor concentración de nutrientes. RPMI desarrollado por Roswell Park Memorial Institute, y también es un medio utilizado en el cultivo de células animales, especialmente para linfocitos de mamíferos. Ambos medios están disponibles comercialmente. Esta es la diferencia entre RPMI y DMEM.
Referencia:
1. “Medios RPMI – Medios RPMI-1640”. Sigma-Aldrich. Disponible aquí
2. «Medio modificado de Eagle de Dulbecco: DME, DMEM». Sigma-Aldrich. Disponible aquí
Imagen de cortesía:
1. ‘Cultivo celular en un diminuto disco de Petri’ Por kaibara87: publicado originalmente en Flickr como Cultivo celular, (CC POR 2.0) a través de Commons Wikimedia
Esta web utiliza cookies propias y de terceros para su correcto funcionamiento y para fines analíticos y para mostrarte publicidad relacionada con sus preferencias en base a un perfil elaborado a partir de tus hábitos de navegación. Al hacer clic en el botón Aceptar, acepta el uso de estas tecnologías y el procesamiento de tus datos para estos propósitos.
Más información
